微生物無(wú)菌室靜壓差和微生物的測(cè)定

微生物無(wú)菌室需要檢測(cè)的項(xiàng)目有多個(gè)，本文主要介紹了靜壓差和微生物測(cè)定方法。

1.微生物無(wú)菌室靜壓差的測(cè)定

維持微生物無(wú)菌室的靜壓差在規(guī)定的范圍內(nèi)，可以有效控制無(wú)菌室的污染。通常所說(shuō)的正壓潔凈無(wú)菌室和負(fù)壓潔凈無(wú)菌室，其實(shí)是反映它與相鄰空間的壓力差△P，如果△P>0，該潔凈無(wú)菌室就是正壓潔凈無(wú)菌室；若△P<0，則為負(fù)壓潔凈無(wú)菌室。所以潔凈無(wú)菌室的絕對(duì)靜壓沒(méi)有太大意義，我們要控制的是潔凈無(wú)菌室與相鄰潔凈無(wú)菌室或室外的壓力差。

(1)檢測(cè)要求

1)靜壓差的檢測(cè)須在潔凈區(qū)內(nèi)的所有門全部關(guān)閉的情況下進(jìn)行。

2)測(cè)試順序應(yīng)在潔凈無(wú)菌室平面上由潔凈度高的潔凈無(wú)菌室到潔凈度低的潔凈無(wú)菌室(或走廊)依次進(jìn)行，一直檢測(cè)到直通室外的房間。

3)測(cè)管口應(yīng)設(shè)在潔凈無(wú)菌室內(nèi)沒(méi)有氣流影響的地方，測(cè)管口平面應(yīng)與氣流方向平行。

(2)測(cè)量?jī)x器

采用YJB-150補(bǔ)償微壓計(jì)(量程0~1500Pa)或微差壓力計(jì)，儀器靈敏度由被測(cè)環(huán)境壓差控制精度而定，宜小于0.1Pa，規(guī)范要求靈敏度不應(yīng)低于2.0Pa。

(3)測(cè)試方法

1)關(guān)閉所有的門。

2)用微差壓力計(jì)，根據(jù)預(yù)先設(shè)計(jì)的測(cè)定順序測(cè)量各潔凈無(wú)菌室之間，潔凈無(wú)菌室與潔凈走廊間，潔凈無(wú)菌室與非潔凈無(wú)菌室之間及非潔凈無(wú)菌室與室外之間的壓差。

3)把上述所測(cè)數(shù)值分別標(biāo)注在已畫好的測(cè)試平面圖上。

(4)合格標(biāo)準(zhǔn)

按上述測(cè)試平面圖所標(biāo)注的壓差數(shù)據(jù)，分別與設(shè)計(jì)或工藝要求的壓差值對(duì)比。若實(shí)測(cè)壓差大于或等于要求的壓差值，則判定為合格；但實(shí)測(cè)壓差值不宜超出標(biāo)準(zhǔn)要求的壓差太多，否則會(huì)產(chǎn)生噪聲且影響開(kāi)關(guān)門，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)在開(kāi)關(guān)門時(shí)影響氣流組織。

2.微生物無(wú)菌室的微生物測(cè)定

空氣中懸浮微生物的測(cè)定方法有空氣懸浮微生物法和沉降微生物法兩種，也即通常所說(shuō)的浮游菌和沉降菌檢測(cè)法。浮游菌檢測(cè)法是利用采樣器收集懸浮在空氣中的微生物粒子于專門的培養(yǎng)基上；而沉降菌測(cè)試方法，是采用直徑為90mm的培養(yǎng)皿，在采樣點(diǎn)上利用自然沉降原理沉降30min進(jìn)行采樣。把采樣后的基片(或平皿)經(jīng)過(guò)恒溫箱內(nèi)37℃、48h的培養(yǎng)生成菌落后進(jìn)行計(jì)數(shù)。使用的采樣器皿和培養(yǎng)液須進(jìn)行滅菌處理，采樣點(diǎn)可均勻布置或取代表性地點(diǎn)布置，浮游菌法采樣點(diǎn)數(shù)可與測(cè)定空氣潔凈度測(cè)點(diǎn)數(shù)相同。采樣時(shí)間應(yīng)根據(jù)空氣中微生物濃度來(lái)決定，沉降菌法的較少培養(yǎng)皿數(shù)應(yīng)符合《通風(fēng)與空調(diào)工程施工質(zhì)量驗(yàn)收規(guī)范》GB50243 - 2002 中表B.5.2的規(guī)定。中凈環(huán)球凈化可提供微生物實(shí)驗(yàn)室、無(wú)菌室的咨詢、規(guī)劃、設(shè)計(jì)、施工、安裝改造等配套服務(wù)。

微生物檢測(cè)前，潔凈無(wú)菌室須處于正常運(yùn)行狀態(tài)。其溫濕度、風(fēng)量、風(fēng)壓及風(fēng)速須控制在規(guī)定值內(nèi)；被測(cè)試的潔凈室已滅菌，測(cè)試人員不得超過(guò)2人，須穿潔凈工作服。采樣前，凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間：對(duì)于單向流潔凈室(ISO-5級(jí))不得少于10min；對(duì)于非單向流潔凈室不得少于30min；工作區(qū)采樣點(diǎn)位置距地面0.8~1.5m，根據(jù)需要可在關(guān)鍵部位增加采樣點(diǎn)。

(1)檢測(cè)方法

1)沉降菌測(cè)試方法

A.把直徑90mm注入培養(yǎng)基的平血(確保無(wú)菌)放在測(cè)點(diǎn)處，開(kāi)蓋暴露(把皿蓋輕輕搭在皿邊上，不得影響采樣) 30min 后，用手指輕推搭在培養(yǎng)皿邊上的皿蓋，將其蓋好，放入培養(yǎng)皿專用容器中。若培養(yǎng)皿放置密度較大，在蓋蓋時(shí)應(yīng)先蓋近處、后蓋遠(yuǎn)處的培養(yǎng)皿，以防蓋蓋操作造成對(duì)培養(yǎng)皿的污染。

B. 把培養(yǎng)皿放入37℃的恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)48h，然后用肉眼計(jì)菌落數(shù)(CFU)，再用放大鏡檢查是否有遺漏。

2)浮游菌的檢測(cè)

A.對(duì)采樣器、培養(yǎng)皿進(jìn)行嚴(yán)格滅菌，采樣口及采樣管在使用前須高溫滅菌。

B.測(cè)試人員應(yīng)穿潔凈工作服。

C.開(kāi)動(dòng)真空泵抽氣，時(shí)間不少于5min，使儀器中的殘余滅菌劑蒸發(fā)，然后調(diào)好流量及轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速。

D.關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿(雙手須滅菌處理)，蓋好蓋子后調(diào)節(jié)采樣器。

E.置采樣口于采樣點(diǎn)后，依次開(kāi)啟采樣器、真空泵，根據(jù)采樣量選定采樣時(shí)間。

F.全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿放入37°C恒溫箱中培養(yǎng)48h，然后用肉眼計(jì)菌落數(shù)，再用放大鏡檢查是否有遺漏。

(2)合格標(biāo)準(zhǔn)

計(jì)算被測(cè)潔凈無(wú)菌室的浮游菌平均濃度C，等于被測(cè)潔凈無(wú)菌室總菌落數(shù)(CFU)除以總采樣量(m³)。

在生物潔凈室中，食品、生物制品的生產(chǎn)環(huán)境所要求的浮游菌菌落數(shù)及潔凈度由相關(guān)規(guī)范給出，由C值來(lái)評(píng)定生物潔凈室是否達(dá)標(biāo)，若C值≤規(guī)定浮游菌菌落數(shù)，則達(dá)標(biāo)。

沉降菌的平均菌落數(shù)按下式計(jì)算

M=（M₁十M₂+...+M_n） /n

式中M---被測(cè)潔凈無(wú)菌室沉降菌平均菌落數(shù)，CFU/皿；

M₁十M₂+...+M_n--- 1號(hào)、2號(hào)、..n號(hào)培養(yǎng)皿的菌落數(shù)；

n---培養(yǎng)皿總數(shù)。

若M≤規(guī)范或工藝要求的沉降菌菌落數(shù)，則被測(cè)潔凈無(wú)菌室的微生物達(dá)到規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。否則應(yīng)查找原因，進(jìn)行滅菌，規(guī)范測(cè)試操作，重新測(cè)試。

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